DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)是研究基因功能的重要工具之一。通過將外源基因?qū)爰?xì)胞中并觀察其表達(dá)和功能變化，可以深入了解基因在細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、代謝等過程中的作用機(jī)制，該轉(zhuǎn)染技術(shù)也是基因治療的關(guān)鍵步驟之一。
 

　　DNA轉(zhuǎn)染的測(cè)定步驟：
 

　　1.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：確保所有試劑、耗材以及儀器設(shè)備已準(zhǔn)備就緒，包括高質(zhì)量的DNA、合適的轉(zhuǎn)染試劑、細(xì)胞培養(yǎng)基等。
 

　　2.細(xì)胞鋪板：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將適量的細(xì)胞接種到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)皿或孔板中，使轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞密度達(dá)到良好狀態(tài)。
 

　　3.制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物：按照轉(zhuǎn)染試劑說明書的要求，將DNA與轉(zhuǎn)染試劑在無血清的培養(yǎng)基中混合，輕輕混勻，并在一定條件下孵育一段時(shí)間以形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物。
 

　　4.更換培養(yǎng)基：去除原有的細(xì)胞培養(yǎng)基，加入無血清的培養(yǎng)基，然后將制備好的轉(zhuǎn)染復(fù)合物逐滴加入到細(xì)胞培養(yǎng)容器中。
 

　　5.細(xì)胞培養(yǎng)：在適宜的條件下(如溫度、CO2濃度等)繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞，使轉(zhuǎn)染復(fù)合物能夠被細(xì)胞充分吸收和內(nèi)化。
 

　　6.檢測(cè)基因表達(dá)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜁r(shí)間點(diǎn)，選擇合適的檢測(cè)方法對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。
 

　　DNA轉(zhuǎn)染方法：
 

　　1.化學(xué)轉(zhuǎn)染法：利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性或正電荷，通過細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。常用的化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑包括DEAE-葡聚糖、磷酸鈣、人工脂質(zhì)體等。
 

　　2.物理轉(zhuǎn)染法：在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生一個(gè)瞬時(shí)的孔從而導(dǎo)入DNA。常用的物理轉(zhuǎn)染方法有電穿孔法、顯微注射和基因槍。
 

　　3.生物轉(zhuǎn)染法：利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細(xì)胞中。常用的病毒載體包括腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒等。